醫(yī)學(xué)檢驗大致可分為形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、血清免疫學(xué)和分子生物學(xué)幾大類,其分別代表幾代實驗診斷技術(shù)。1985年Mullis發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR )技術(shù),使醫(yī)學(xué)界真正興起了基因診斷技術(shù)熱,成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展的又一里程碑。隨著PCR技術(shù)的不斷發(fā)展,與分離培養(yǎng)或免疫學(xué)技術(shù)相比,其以特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、操作簡便等特點,逐漸成為各類病原體診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”,在常見傳染病、性病、腫瘤、遺傳病、寄生蟲病、優(yōu)生優(yōu)育、法醫(yī)學(xué)等廣泛領(lǐng)域中有相當(dāng)高的實際應(yīng)用價值。常見的傳染性疾病有細(xì)菌、病毒、衣原體、支原體等,可引起消化、呼吸、循環(huán)、泌尿生殖等不同系統(tǒng)相應(yīng)的病變。
消化系統(tǒng)感染性疾病在我國具有代表性意義的有肝炎、腸道感染性疾病。引起肝炎的病原體主要包括乙型肝炎病毒(乙肝)、丙型肝炎病毒(丙肝)。PCR 法檢測乙肝的優(yōu)勢表現(xiàn)在:1.早期診斷,PCR 擴(kuò)增極其敏感,理論上在感染潛伏期即可檢出。2.靈敏度高,對部分乙肝患者體內(nèi)的病毒長期低復(fù)制感染,血清病毒濃度極低,一般酶標(biāo)試劑無法檢出,可以通過PCR法檢出。3.療效跟蹤及病程判斷,PCR技術(shù)能定量檢測乙肝病毒基因,為指導(dǎo)臨床用藥提供依據(jù)。
目前,性傳播疾病(STD)已成為威脅人們健康的主要問題之一.除AIDS外,人乳頭瘤病毒(HPV),單純皰疹病毒(HSV),沙眼衣原體(CT)也 是引起STD的常見病原體.盡管目前已有多種檢測方法,但大多比較費時且檢測靈敏度不夠高. 現(xiàn)存檢測方法的不足主要表現(xiàn)為對細(xì)菌、寄生蟲等病原體主要使用鏡檢的方法,這種分法很容易漏檢;對支原體、衣原體等采用培養(yǎng)法檢測,人所共知培養(yǎng)法不僅費時、價格昂貴而且受到采樣、因藥治療情況等多種因素影響,敏感度出不高等。PCR法的出現(xiàn)為STD檢測提供了一個可靠的檢驗方法。PCR法直接檢測病原體基因是最直接的感染證據(jù),并且簡單快速可以在數(shù)小時內(nèi)得到明確的結(jié)果。PCR法的高敏感性,可以把目的基因片段在短短的數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至數(shù)萬倍以上,因此不易造成漏診,這在病人感染的極早期或潛伏期的診斷有相當(dāng)重要的意義。
呼吸道感染是指病原體感染人體的鼻腔、咽喉、氣管和支氣管等呼吸系統(tǒng),分為上呼吸道感染和下呼吸道感染。常見的呼吸道病原體主要有病毒、細(xì)菌、支原體、衣原體和立克次體等。由細(xì)菌引起呼吸道感染機(jī)會比病毒少,但感染后的癥狀多較嚴(yán)重,主要病癥為扁桃體炎、中耳炎、鼻竇炎等。由細(xì)菌引起的兒童肺炎是流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌或金黃色葡萄球菌。引起呼吸道感染的病毒包括鼻病毒、冠病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、腺病毒等。支原體、衣原體感染導(dǎo)致的早期臨床表現(xiàn)與其他病原體感染類似。在小于30歲的年輕人中,肺炎支原體是最重要的下呼吸道病原體。PCR以其操作簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)等特點,能篩查確診早期患者感染病原體,提供對癥用藥指導(dǎo),在呼吸道病原體檢測方面有著廣泛應(yīng)用。